Peptide Synthesis with Polymer Bound Active Ester III. The Effect of Spacer Arm in Peptide Synthesis with 1-Phenyl-3-methyl-4-oximino pyrazole Resin

고분자에 결합된 활성 에스테르에 의한 펩티드합성 III. 1-페닐-3-메틸-4-옥시미노피라졸레진을 이용한 펩티드 합성에서 Spacer Arm의 효과

Aminomethyl polystyrene resins were prepared either from chloromethyl-resin(Merrifield resin) or from direct amidoalkylation of polystyrene resin. Two kinds of aminomethlyl resin were lengthened with spacer arms via sequential coupling of five ${\varepsilon}$-aminocaproic acids(ACA) respectively. In case of the resin prepared from the Merrifield resin, the amounts of free amino group of the resin were reduced by 25~30% after each coupling of ACA. But the one from direct amidoalkylation showed 3~5% loss after each coupling of ACA. 4-Nitroso-5-aminopyrazole resin was made by reacting ACA spacer arm resin, which was made from direct amidoalkylated resin, with 5-phenyl-7-methylpyrazole [4,3-c][1,2,4]oxadiazin-3-one. Several polymeric active esters of N-blocked amino acids were prepared from the 4-nitroso-5-aminopyrazole bound resins. In anchoring step of the amino acid derivatives on the resin, no substantial effect of bulkiness was found. 4-Nitroso-5-aminopyrazole bound active ester resins were found to be very reactive in N-acylation, The resulting peptides were obtained with 90~95% yield and characterized by NMR and other physical methods.

Aminomethyl레진을 chloromethyl레진(Merrifield레진)으로부터 또는 polystyrene레진을 직접 amidoalkylation하여 각각 합성하였다. 두 종류의 aminomethyl레진을 이용하여 5개의 ${\varepsilon}$-aminocaproic acid(ACA)가 차례로 커플링 된 spacer arm을 가진 레진들을 각각 합성하였다. Chloromethyl레진으로부터 합성된 aminomethyl레진의 경우 ACA를 매번 커플링 할 때마다 25~30%의 유리 아미노기의 양이 감소하였으며, 직접 amidoalkylation에 의해 합성한 amlnomethyl 레진의 경우 매 커플링 단계 마다 3~5%의 유리 아미노기의 양이 감소하였다. 4-Nitroso-5-aminopyrazole 기능기를 가진 레진은 직접 amidoalkylation하여 얻은 레진에 ACA를 spacer arm으로 커플링시켜 얻은 레진과 5-phenyl-7-methylpyrazole[4,3-c][1,2,4]oxadiazin-3-one을 반응시켜 얻었다. 4-Nitroso-5-aminopyrazole 기능기를 가진 레진을 이용하여 ${\alpha}$-아미노기가 보호된 여러 가지 아미노산의 활성에스테르 레진들을 합성하였다. 4-Nitroso-5-aminopyrazole 기능기를 가진 활성 에스테르 레진은 N-acylation 반응에 매우 뛰어난 반응성을 나타내었다. 또한 입체장애 효과 없이 아미노산 유도체의 종류에 거의 무관하게 아실화 반응이 일어났으며 90~96%의 수율로 펩티드들을 합성할 수 있었다. 얻어진 펩티드들은 NMR을 비롯한 여러 가지 물리적 방법으로 그 순도를 확인하였다.