Arginase Activity in Response to pH Change in Canavalia Lineata Callus

해녀콩 캘러스에서 pH 변화에 따른 Arginase의 활성

해녀콩(Canavalia lineata L. DC) 잎에서 유도한 캘러스를 pH 8인 완충용액에 한 시간 동안 처리하면 pH 6에서 보다 arginase의 활성이 약 두 배로 증가했다. 캘러스에서 얻은 arginase의 조효소액을 Sephacryl S-200 컬럼에서 분획하면 분자량이 각각 380 kD과 179 kD으로 나타났는데 분자량이 큰 arginase의 분획은 pH 8 처리구에서 각각 상대적으로 많이 나타났다. 그리고 pH 6에 0.5 mM Mn2+를 첨가하였을 때도 380 kD arginase의 분획이 크게 나타났으며, pH 6 처리에서 얻은 179 kD arginase 분획에 pH 8 처리를 하면 380 kD 분획으로 쉽게 전이될 수 있었다. pH 6 처리 후 추출한 arginase는 Mn2+의 첨가로 활성이 크게 증가하여 pH 8 처리 후 추출한 arginase와 비슷한 활성을 보이나, pH 8 처리 후 추출한 arginase는 Mn2+의 첨가로 더 이상의 활성증가를 보이지 않았다. Mn2+이 없는 조건에서 두 arginase의 Km값과 Vmax를 조사한 결과, 380 kD arginase는 22 mM과 1.61 $\mu$mole urea.min-1.mg-1 protein, 그리고 179 kD arginase는 30 mM과 0.79 $\mu$mole urea.min-1.mg-1 protein으로 측정되었다.