우 체외수정란의 초기발생에 미치는 난구세포의 영향

Early Development Bovine Zygotes Co-cultured with Cumulus Cells

소의 난포난자를 체외에서 성숙시켜, 수정후 8시간에서 난구세포가 부착된 난자와 기계적으로 완전히 제거한 난자를 10% FCS가 첨가된 TCM-199배양액에 옮겨, 수정 56시간에서 2∼8세포기로 분할한 난자만을 5일간 계속 배양하여 초기배의 발육 상황을 검토하였다. 그 결과, 난구세포가 부착된 난자(31%)는 제거한 난자(15%)에 비해 상실배와 배반포기까지의 발달이 유의적으로 높았다(p<0.01). 한편, 난구세포와의 공동배양 조건하에서, 발생배지에 첨가하는 단백질원의 영향을 조사한 결과, BSA(59%)를 첨가한 경우 FCS(32%) 또는 CS(37%) 첨가보다 초기배의 발육율이 유의적으로 높았다(p<0.01). 이상의 결과로부터, 소의 수정란과 난구세포와의 공동배양시 BSA가 초기발생에 촉진적 효과가 있음이 시사되었다.

Bovine follicular oocytes were matured, fertilized and cultured in vitro. Oocytes with or without cumulus cells were transferred into TC-I99 medium supplemented with 10% FCS 8 h after insemination, and embryos cleaved to 2- to 8-cell stage 56 h after insemination were cultured further for 5 days. The proportions of embryos developed to morular and blastocyst stages were significantly higher (P<0.0l) in those cultured with(31%) than without(15%) cumulus cells. When the embryos were cultured with cumulus cells in the medium with different protein sources, the highest proportion(59%) of embryos developed to morular or blastocyst stage was obtained in medium with BSA(P<0. O01). Higher proportions of embryos were degenerated during culture with FCS(15%) or CS(14%) compared with BSA(3%). The present results indicate the early development of in-vitro fertilized bovine embryos can be maintained efficiently by BSA when they were co-cultured with cumulus cells.