단세포군항체를 이용한 효소면역억제측정 법에 의한 유구낭미충증의 혈청학적 진단

Serodiagnosis of cysticercosis by ELISA-inhibition test using monoclonal antibodies

유구낭미충 항원에 대한 단세포군항체를 제조하여 그 특성을 분석하고, 이를 효소면역억제측정법 (ELISA-inhibition test)에 응용함으로써 통상적인 효소면역측정법(ELISA)의 특이도를 더욱 높이고자 하였다. 유구낭미충의 두절항원으로 면역한 BALB/c 마우스의 비장세포와 형질세포종세포를 융합하여 림프잡종세포를 만들고, 이 중에서 유구낭미충 항원에 대한 특이 단세포군 항체를 생성하는 4개의 림프잡종세포군을 선택하였다. EITB상 Cya-1 단세포군항체는 25.5 kDa, Cya-7은 28 kDa, Cya-28은 87.5 kDa, Cya-31은 12.5 kDa 항원대에 각각 반응하는 것을 알 수 있었다. 간접면역 형광항체법으로 Cya-1는 칼슘소체에, Cya-7은 실질조직에, Cya- 28과 Cya-31은 충체 표피에 주된 반응을 나타내고 있었다. 유구낭미충 항원을 사용한 효소면 역측정법으로는 유구낭미충 감염자 28명의 혈청 중 23명 (82. l%)이 양성 반응을 보였으며 폐흡충 감염자 31명 중 6명(19.4%), 스파르가눔 감염자 9명 중 1명(11. l%)이 교차 반응을 보였다 반면, 특이 단세포군항체 Cya-7를 이용한 효소면역 억제측정법으로는 유구낭미충 감염자는 28명 중 19명 (67.9%)이 양성반응을 보였고, 다른 기생충 감염자 혈청과의 교차 반응은 관찰되지 않았다.

Monoclonal antibodies (Mabs) were produced against crude scolex extract of T solium metacestodes, and applied to ELISA-inhibition test for improving the specificity of serodiagnosis of human cysticercosis. Four hybridomas secreting species-specific anti- cysticercal Mabs (Cya-1, Cya-7, Cya-28 and Cya-31) were selected. Each Mab reacted on antigenic components of 25.5 kDa (Cya-1), 28 kDa (rcya-7), 87.5 kDa (Cya-281), and 12.5 kDa (Cya-31). IFA showed that Cya-1 was located at the calcium corpuscles, and Cya-7 at the loose connective tissue of T soLium metacestode scolex. Cya-28 and Cya-31 reacted on the tegument of the scolex. By conventional ELISA, 23 out of 28 (82.1%) cysticercosis patients were found serologically positive, but 1 out of 9 (11.1%) sparganosls cases and 6 out of 31 (19.4%) paragonlmiasis cases showed false positives. By ELISA-Inhibition test using species-specific anti-cysticercal Mab Cya-7, 19 out of 28 (67.9%) cystlcercosis cases were found serologically positive, but there were no false positives In other parasitic infections.