요꼬가와흡충증 항체진단의 검토 및 특이 항원 단백질 분석

Antigenic protein fractions of Metagonimus yokogawci reacting with patient sera

요꼬가와흡충증은 주로 은어회를 먹어 감염되는 흡충증으로서 소장염(소장염)을 일으켜 피로 감, 복통, 설사 등 중상이 나타나며 말초혈액 호산구증가를 동반한다. 이 흡충중은 대변에서 충란을 검출하여 진단하나 급성 장염으로 발현하는 환자의 일부에서는 대변검사로 충란을 발견 할 수 없어 보조적인 진단으로 특이항체검사가 필요한 경우가 있다. 이 실험은 요꼬가와흡충증 의 특이항체검사의 가치를 검토하고 검사에서 항원으로 사용하는 피낭유충 생리식염수 추출액 내 특이항원 단백질을 찾기 위하여 실시하였다. 항원으로는 요꼬가와흡충 피낭유충의 추출액을 사용하였고 감염 및 대조혈청은 인상적으로 급성 요로가와흡충증으로 진단한 환자 11명, 간질 (간질) 환자 5명, 간흡충 환자 5명, 폐흡충 환자 5명과 대조군 11명의 것을 사용하였다. 항체 검사로 효소면역측정 법으로 특이 IgG항체를 검사한 결과 임상적으로 진단한 요꼬가와흡충증 환자 11명중 10명이 양성반응을 나타내었다. 요꼬가와흡충 항원에 대하여 다른 흡충 감염자 혈청도 교차반응을 보였으나 동종항원에 대하여 가장 높은 흡광도를 나타내었다. 따라서 특이항체검사에서는 여러가지 흡충항원에 대한 항체검사를 동시에 검사할 필요가 있다고 판단하였다. 항원 구성 단백질을 관찰하기 위하여 7.5-15% gel에서 SDS-PAGE한 결과 항원에서 주(주)단백질대 14개 이상을 구별할 수 있었다. SDS-PAGE/immunoblot을 실시하여 요꼬가와흡충증에서만 반응하는 특이항원대를 검색한 바, 항원 단백질대 대부분이 다른 흡충증 환자 혈청과 교차반응을 나타내었으나 66 및 22 kDa 단백질대는 교차반응이 제일 적어 특이항원 단백질이라고 판단하였다.

Antibody test is sometimes necessary for the diagnosis of acute human metagonimiasis because eggs may not be detected in stool. The antibody test (ELISA) was evaluated for its significance by reacting human sera from clinically diagnosed metagonimiasis, fascioliasis, clonorchiasis and paragonimlasis with 4 crude extracts of Metosonimn vokognwai (metacercariael , adults of Fosciola hepatica Cronorchis sinenis and Paragonimus westermoni. By ELISA, 10 of 11 metagonimlasis sera showed the highest absorbance (abs.) to the homologous antigen. Cross reactions to M. yokogawai antigen occurred most frequently in clonorchiasis sera. The antigenic protein fractions in M. vokogawai metacercarial extract were observed by SDS-PAGElimmunoblot using patients and control sera together with experimental cat sera. Out of 14 protein bands In the extract, 11 bands were reacting. Cross reacting bands to other trematodiasis sera were frequently observed. Of the reacting bands, 66 and 22 kDa proteuls were recognized as specific for metagonimiasis.