Aflatoxin $B_1$의 검출을 위한 효소면역측정법의 개발

Development of an Enzyme-Linked Immunosorbent Assay for the Iletection of Aflatoxin $B_1$

  • 손동화 (서울대학교 농업생명과학대학 농업생물신소재연구센터) ;
  • 박애란 (서울대학교 농업생명과학대학 농업생물신소재연구센터) ;
  • 서병철 (서울대학교 농업생명과학대학 농업생물신소재연구센터) ;
  • 김진철 (서울대학교 농업생명과학대학 농업생물신소재연구센터) ;
  • 이인원 (서울대학교 농업생명과학대학 농업생물신소재연구센터) ;
  • 남영중 (한국식품개발연구원 이화학연구부) ;
  • 허우덕 (한국식품개발연구원 이화학연구부)
  • 발행 : 1992.04.01

초록

효소면역측정법에 의한 aflatoxin $B_1(AFB_1)$의 정량법을 개발하기 위하여, 항체를 생산.정제하여 분석법을 확립하고 직접법과 간접법(direct/indirect competitive ELISA)의 특성 및 문제점을 비교. 검토하였다. Bovine serum albumin(BSA)을 carrier protein으로 한 $AFB_1$-1-(O-carboxymethyl)oxime -BSA를 토끼에 면역하여 항$AFB_1$항혈청을 생산하였다. 정량 침강반응에 의하여 항혈청으로부터 항BSA항체를 제거하고 황산암모늄 침전법 및 EDAE-Sephadex A-50 이온교환 크로마토그래피를 통하여 순도 높은 IgG항체를 정제하여 항$AFB_1$항체를 사용하였다.

In order to develop an enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) for detecting aflatoxin $B_1(AFB_1)$, we produced and purified antibodies, thereafter established and evaluated methods of direct and indirect competitive ELISA. Anti-AFB, antisera, produced by immunizing rabbits with $AFB_1$-1-(0-carboxymethy1)oxime-bovine serum albumin conjugate ($AFB_1$-BSA), were removed of anti-BSA antibodies by quantitative precipitation reaction and further purified by ammonium sulfate precipitation and DEAE-Sephadex A-50 ion exchange chromatography. Purified IgG fractions were used as anti-$AFB_1$ antibodies. The antibodies, whose titer was deterrnined extremely high above $2 \times 10^6$, showed low cross-reactivity of 3~34% against $AFB_1$ analogues such as G2, B2, and GI. From the standard curves of direct and indirect competitive ELISA for AFBI, the detection ranges were found 0.2~20 and 1~10, 000 ng/ml(ppb) respectively. In their sensitivity, stability, simplicity, and rapidity, the direct method was more suitable than the indirect method for practical use.

키워드