The maintenance of free-living amoebae by cryopreservation

자유생활 아메바의 냉동보관

We have successfully cryopreserved free-living amoebae in order to maintain them feasibly under the conditions in our laboratory. The viability of trophozoites was higher when frozen by slow cooling (overall $0.7^{\circ}C$/min) than by fast cooling (overall $1.3^{\circ}C$/min). Glycerol and dimethylsulfoxide at the final concentration of 7.5% each was used for cryopreservation of free-living amoebae trophosoites. The survival rate was 2∼39% after storage in the liquid nitrogen for 60 days. Gross cultural or morphological changes were not noted in trophozoites thawed from frozen suspensions.

자유생환 아메바를 효과적으로 유지할 목적으로 냉동보관을 시도하였다. Glycerol과 Dimethylsulfoxide를 각 각 최종농도 7.5%가 되도록 아메바현탁액에 첨가하였다. 아매바 영양형을 냉동하는 과정에서 온도 하강속도가 빠를때 (평균 $1.3^{\circ}C/min$)보다 느릴때 (평균 $0.7^{\circ}C/min$) 생존력이 더 높았다. 액체질소 속에서 60일동안 보관한 후의 생존율은 처음 넣어준 아메바 영양형 수의 2~39%에 달하였다. 냉동 보관했던 아메바를 해동했을 때 어떤 형태적 변화나 배양했을 때의 문제점도 관찰되지 않았다.