Endonuclease Restriction Patterns of Chloroplast DNA in Somatic Hybrids Obtained by Protoplast Fusion of Nicotiana tabacum and N. glutinosa

Nicotiana tabacum과 N. glutinosa간 원형질체융합 식물체에 있어서 엽록체 DNA의 제한효소단편의 유형

  • Published : 1991.03.01

Abstract

Mesophyll protoplasts of Nicoliana labacum ($NR^{-}/SR^{+}$) and N glulinosa were electrofused with AC field of 0.5 MHz and 1 kV DC pulse for 2 ms. Fused protoplasts were selected and cultured to the green cell clusters in $MSNO_3$ medium containing 1.2 mg!ml streptomycin sulfate. Four plant lines regenerated from selected colonies showed both parental morphological characteristics of leaf and flower and these plant lines were confirmed as somatic hybrids based on electrophoretic patterns of leaf peroxidase. In XhoI restriction patterns of chloroplast DNA, these hybrid plant lines expressed both parent common restriction sites and parent specific sites. One of these hybrid lines exhibited interspecific pattern of both parental chloroplast genomes. indicating nine both parent common sites, one N labacum specific site and two N glutinosa specific sites. sites.

Nicotiana ($NR^{-}/SR^{+}$)과 N. glutinosa간 전기적 (0.5 MHz의 AC와 2 ms 동안 1 kV DC) 원형질체 융합에서 선발은 1.2mg/ml의 streptomycin이 첨가된 $MSNO_3$ 배지를 통하여 가능하였으며, 이 융합세포의 분열이 지속되어 형성된 녹색 세포괴를 얻었다. 이 녹색 세포괴에서 재분화된 4개의 식물 계통들은 꽃과 잎에서 모식물체의 특징을 보였으며, 엽조직의 peroxidase 동위효소 유형 분석에서도 양쪽 모식물체의 특성을 갖고 있었다. XhoI의 제한효소 절단에 의해 융합식물체 계통의 엽록체 DNA의 분석에서도 융합체 식물계통들은 N. tabacum과 N. glutinosa에서 공통되는 단편과 모식물체 유래 단편을 보였고, 이 융합식물계통들 중 한 계통은 9개의 공통 단편에 N. tabacum의 1개 단편, N. glutinosa의 2개 단편이 추가되어 있는 유형을 보여 N. tabacum과 N. glutinosa의 엽록체 게놈을 모두 소유하고 있다는 것을 보여주었다.

Keywords