IgG와 IgM 항체를 유도하는 sparganum의 항원에 관한 면역조직화학적 및 전기영동에 의한 연구

Immunohistoehemical Observation on the Antigens Inducing IgG and IgM Antibodies against Sparganum

스파르가눔을 흰쥐와 흰생쥐에게 인긍 구강감염을 시켜 감염 2주후부터 숙주의 기생부위에서 충체와 함께 둘레의 조직을 적출하여 동결절편을 만들고 이것을 ABC면역효소표지법과 간접형광항체법 (IFA)으로 항원성분의 분포와 그 추이를 추구한 결과, IgG 항체에 의한 면역반응이 충체의 망상유조직에서 인지되었으며 특히 ABC면역효소표지법에 의하면 유조직 중 수질에서 보다 피질층에서 강한 반응성을 나타났다. 이 중에서도 석회소체가 있는 곳에 염색 반응성이 강하였다. 감염후기에서는 스파르가눔의 외피 (tegument) 내외면과 충체를 둘러 싸고 있는 피낭의 막면, 피막 밖에 있는 섬유성 결합조직과 근조직의 간극에서도 항원성분을 관찰할 수 있다. 특히 결합조직 사이에 분포된 소혈관의 둘레와 현관 외벽에 강한 반응이 나타났다. IgM 항체에 인지된 항원성분도 충체의 유조직층중 피질충에서 강한 반응이 나타났다. 스파르가눔의 추출 조항원성분과 배설분비 항원성분을 SDS-PAGE한 후 nitrocellulose 막에 영동전이하여 IgG, IgM 항체를 유도하는 항원성분을 ABC효소표지 항체 법으로 조사하였다. 스파르가눔의 추출 조항원 성분 중 흰쥐의 IgG 항체에 인지된 항원 성분은 23개이고 IsM 항체에는 15개의 항원성분이 인지되었다. 흰생쥐에서는 IgG 항체로 I6개 항원성분이, IgM 항체에 9개의 항원성분이 인지되었다. 배설분비 항원성분 중 횐쥐의 IgG 항체에 20개 항원성분이, IgM 항체에는 5개의 항원 성분이 인지되었다. 횐생쥐의 IgG 항체에 18개, IgM 항체에 11개의 항원성분이 인지되었다. 조창원성분 중 15개 항원성분과 배설분비 항원성분중 13개의 항원 성분이 흰쥐, 흰생쥐의 IgG 항체에 모두 교차반응이 일어났으며 IgM 항체에 반응한 항원성분중 IgG 항체와도 교차반응이 있었다.

Localization and characterization of the antigenic components of sparganum which induced IgG and IsM antibodies in the host were studied by immunohistochemical techniques and SDS-PAGT and Western blotting. The antigen recognized by IgG antibody of rats or mice which were immunised by infection or injection of crude extracts of metacestodes of Spirometra erinacei, was located in the parenchyme of sparganum, especially at the cortex and around the calcareous corpuscles. The immunoreaction was demonstrated not only in the encysted fibrous wall of host but around the arterioles or venules in the connective tissue of host. The antigen recognized by IgM antibody of rats or mice was also observed in the parenchyme of sparganum and in the connective tissue of host. By 5∼20% gradient SDS-PAGE and EIBT, we detected antigenic components by IgG and 1gG antibodies of the rat or mouse immunized by infection or injection of crude extract of spargana. Twenty-three antigenic bands from crude extracts of spargana were recognized by IgG antibody and 15 components by IgM antibody of immunized rats. Out of the bands recognized by IgG and IgM antibodies, 15 were cross-reacted each other. Twenty components of eBlcretory-secretory proteins from spargana were recognized by IgG, and 5 components by IgM antibody of immunized rats. By IgG and IgM antibodies of immunized mice, 16 components of crude extracts were recognized by IgG antibody and 9 components by IgM antibody. Twenty components of excretory-secretory preparation were recognized by IgG antibody and 5 components by IgM antibody. Thirteen components of crude extracts were cross-reacted by IgG antibody of rats and mice.