cis-Diamminedichloroplatinum (II) induces denaturation and conformational changes in pBR322 DNA

cis-Diamminedichloroplatinum(II)에 의한 pBR322 DNA의 변성과 구조 변화

  • 구자춘 (경희대학교 유전공학과) ;
  • 임창수 (경희대학교 유전공학과) ;
  • 한태룡 (경희대학교 유전공학과) ;
  • 양재명 (성균관대학교 유전공학과)
  • Published : 1990.12.30

Abstract

E. coli LE392, transformed with CDDP-treated pBR322 DNA, was plated on ampicillin containing media. The number of colonies formed on ampicillin containing agar plate was reduced to undetectable level after treat the DNA with 13.3 ${\mu}M$ CDDP. The CDDP-treated pBR322 DNA was susceptible to sing1e strand DNA specific S1 nuclease and it's migration Pattern in agarose gel electrophoresis was changed. These results suggest that CDDP adduction to pBR322 DNA resulted in denaturation of the double helix and changes in it's conformation which ultimately leads In the inactivation of the ampicillin resistant sere.

CDDP를 처리한 pBR322 DNA로 형질변환된 대장균 LE392를 ampicillin이 포함된 한천평판배지위에 도말시켰다. Ampicillin을 함유하고 있는 평판배지위에 형성된 집락수는 13.3 ${\mu}M$의 CDDP를 처리한 뒤에는 검출되지 않을 정도로 감소하였다. CDDP를 처리한 pBR322 DNA는 외가닥 DNA에 특이성이 있는 S1 핵산분해호소에 의해 전달되었고 아가로즈 겔 전기영동상에서 이동 유형이 변했다. 이러한 결과에 의하면 CDDP가 pBR322 DNA에 반응하여 이증나선의 변성과 궁극적으로는 ampicillin 저항성 유전자를 불활성화시키는 구조변화를 일으키는 것 같다.

Keywords