Effects of pH on the Separation and Purification of Model Protein using Counter Current Distribution

역류분배를 이용한 모델단백질의 분리정제시 pH의 영향에 관한 연구

The changes in the partition coefficient of model proteins (lysozyme, myoglobin, conalbumin, bovine serum albumin) in an aqueous two-phase system formed by polyethylene glycol and dextran were examined in order to improve the capacity of counter current distribution for the protein fractionation and concentration. The protein distribution patterns in CCD with 30 tubes varied with the pH of the system, and both theoretical and measured values agreed well. From the mixture of model protein, pure BSA fraction was appeared at the upper-phase of 14th tube having pH 4.5, pure myoglobin at the lower-phase of the 16th be with pH 6.5 and conalbumin at the lower-phase of 4th tube with pH 12. The result indicated the possible use of CCD method for protein fractionation, if the partition coefficient of proteins was manipulated by pH and other means.

역류분배 방법을 이용한 단백질의 분리정제 가능성을 높이기 위하여 4가지 모델단백질에 대하여 수용성 액체 2상계에서의 분획계수를 pH 변화에 따라 조사하였다. 또한 역류분배를 이용한 다중분배추출방식으로 모델 단백질의 혼합물을 수준의 pH(4.5-12.0)에서 분획하였다. 그 결과 pH에 따라 단백질들의 등전점 차이로 인한 분획계수(K)값이 다르게 나타서, 다중분배를 행할 때 각 단백질 분획들이 위치하는 튜브번호가 다르게 되므로 역류분배 방법을 통한 단백질의 분리 가능성을 보여주었다.