소성장호르몬 유전자의 조직 특이성 발현에 미치는 바이러스 engancer의 영향

Effect of Viral Enhancers on the Tissue-Specific Expression of Bovine Growth Hormone Gene

조직특이적 및 일반적 유전자 발현에 미치는 SV40와 murine cytomegalovirus (MCMV) enhancer의 영향을 조사하였다. 이를 위하여 chloramphenicol acetyl transferase (CAT) 유전자의 아래쪽에 이들 enhancer들을 삽입한 재조합 플라스미드 들을 제조하였다. 원숭이세포(CV1PO)와 HeLa 세포에 이들 플라스미드들을 이입시킨 후, CAT 유전자가 발현되는 정도를 조사하였다. Enhancer가 없는 플라스미드에 비해 SV40와 MCMV enhancer는 CAT의 발현을 각각 20배와 150배로 가중시켰다. CAT 유전자의 앞에 있는 SV40 프로모터를 2.2kbp의 소성장호르몬(bGH) 유전자의 조절부위로 치환한 경우는 enhancer가 있어도 전혀 CAT 의 말현이 검출되지 않았다. 조절부위을 230 bp 로 짧게 하여 치환한 경우는, SV 40 enhancer 가 있을 때, CAT의 말현이 매우 증가하였다. 이와는 내조적으로 더 강한 MCMV enhancer는 bGH 특이적인 발현을 별로 증가시키지 못하였다.

The effect of SV40 and murine cytomegalovirus (MCMV) enhancers on the general and tissue-specific gene expression was investigated. Recombinant plasmids containing these transcriptional engancers downstream of a structural gene for chloramphenicol acetyl transferase (CAT) were constructed. The transient expression of CAT gene from these plasmids was measured in monkey (CV1PD) and HeLa cells. Both SV40 and MCMV engancers activated the expression of CAT gene by more than 20 and 150 folds, respectively, compared with engancerless plasmids. When the SV40 promoter, upstream of CAT gene, was replaced with 2.2 kbp of promoter regulatory region of bovine growth hormone (bGH) gene, there was no expression of CAT even in the presence of enhancers, reflecting the tissue-specific expression of bGH genes. However, when the bGH regulatory region was shortened to 230 bp, the expression level increased dramatically in the presence of SV40 enhancers. In contrast, the expression from the shortened promoter was only marginally activated by the stronger MCMV enhancer.