Abstract
The transformation of Saccharomyces cerevisiae with YIp26, YRp7 and YEp13 was investigated. Transformation frequences of YIp5, YIp26, YRp7 and YEp13 in Escherichia coli HB101 was $5.1{\times}10^{-4}$, $1.5 {\times}10^{-3}$, $1.3{\times}10^{-3}$, $3{\times}10^{-3}$, respectively. When plasmids were used in covalently closed circular form, transformation frequency of YEp13 was $1.2{\times}10^{-4}$ in S. cerevisiae DBY747 and $3.3{\times}10^{-4}$ in S. cerevisiae MC16 and that of YRp7, YIp26 was $3{\times}10^{-6}$, below $6{\times}10^{-8}$ respectively in S. cerevisiae DBY747 by the method of Ito. Cotransformation of YIp26 and YEp13 in linear form increased the frequency of transformation with efficiences 270-fold higher than transformation of YIp26 only in S. cerevisiae DBY747. In cotransformation of YIp5+YEp13 and YIp26+YRp7 with S. cerevisiae DBY747 by Beggs' method. Expression frequency of YIp5+YEp13 and YIp26+YRp7 was $4{\times}10^{-6}$, $1.5{\times}10^{-6}$, respectively. The recombinant plasmid of cotransformant was thought that YIp26 and YEp13, YIp5 and YEp13, and YIp26 and YRp 7 were ligated in vivo in S. cerevisiae DBY747.
대장균(大腸菌)과 효모(酵母)의 셔틀 벡터인 YIp, YRp, YEp를 S. cerevisiae MC 16, DBY747에 형질전환(形質轉換)시켰다. 이들 벡터들을 대장균(大腸菌)에 형질전환(形質轉換)시켰을 때 그 빈도(頻度)가 YIp5, YIp26, YEp13, YRp7에서 각각 $5.1{\times}10^{-4}$, $1.5{\times}10^{-3}$, $3{\times}10^{-3}$, $1.3{\times}10^{-3}$으로 나타났다. YEp13을 MC16과 DBY747에 Ito 법(法)으로 형질전환(形質轉換)시켰을 때 MC16, DBY747에서의 빈도(頻度) 각각 $3.3{\times}10^{-4}$, $1.2{\times}10^{-4}$으로 나타났다. DBY747을 수용세포(受容細胞)로 하여 YRp7과 YIp26을 환상(環狀)으로 각각 형질전환(形質轉換)시켰을 때 그 빈도(頻度)는 각각 $3{\times}10^{-6}$, $6{\times}10^{-8}$이하로 나타났다. DBY747을 수용세포(受容細胞)로 하여 YEp13과 YIp26을 선상(線狀)으로 절단하여 $Li^+$ 처리(處理)한 S. cerevisiae에 cotransformation을 하였을 때 YIp26+YEp13 ($Leu^+$, $Ura^+$)의 cotransformant는 $1{\times}10^{-5}$ 빈도(頻度)가 나왔으며 YIp26과 YEp13에 대한 각각의 빈도(頻度)는 $10^{-7}$ 이하, $5{\times}10^{-5}$ 빈도(頻度)로 나타났다. 또 YIp5와 YEp13, YIp26과 YRp7을 원형질체화(原形質體化)한 S. cerevisiae DBY747에 cotransformation 하였을 때 빈도(頻度)는 YIp5+YEp13은 $4{\times}10^{-6}$으로 나오고 YIp26+YRp7에서 $1.5{\times}10^{-6}$으로 나타났다.