Induction of Cyclohexanol Dehydrogenase in Acinetobacter calcoaceticus C10

Acinetobacter calcoaceticus C10에 의한 Cyclohexanol Dehydrogenase의 유도

A. calcoaceticus C10 grown on cyclohexanol as sole source of carbon and energy produced cyclohexanol dehydrogenase(CDH) and glucose dehydrogenase (GDH) concomitantly. CDH and GDH were different in coenzyme, induction and electrophoretic patterns. CDH depended for activity on $NAD^+$ only, while GDH required $NAD^+$ or $NADP^+$ alternatively. CDH was produced in the medium added cyclohexanol, but GDH was produced in various media such as LB, LB added 0.2% glucose or cyclohexanol and cyclohexanol medium. Productivity of CDH in A. calcoaceticus C10 was enhanced about 8 times by the addition of 0.2% cyclohexanol to LB medium after 4 hours as much as LB medium only. Production of CDH was induced by cyclohexanol, cyclohexanone, cyclohexan-1,2-diol and cyclohexene oxide, but not induced by ${\varepsilon}-caprolactone$ and adipate.

CL 배지에서 자란 A. calcoaceticus C10은 glucose dehydrogenase(GDH)와 cyclohexanol dehydrogenase(CDH)를 모두 생산하였다. A. calcoaceticus C10에 의한 사이클로헥사놀의 산화가 비특이적인 GDH에 의한 것인지를 알아보기 위하여 GDH와 CDH의 차이를 조사한 결과 GDH는 $NAD^+$와 $NADP^+$를 모두 조효소로 이 용하였으나 CDH는 $NAD^+$만을 조효소로 이용하였으며 $NADP^+$를 이용하지 못하였다. GDH는 LB 배지와 0.2%의 포도당 또는 사이클로헥사놀을 첨가한 LB 배지 및 CL 배지에서 모두 생산되었으나 CDH는 사이클로헥사놀을 첨가한 배지에서만 생산되었으며 7.5% polyacrylamide 젤 전기영동 결과 GDH와 CDH는 서로 다른 활성 밴드를 나타내었다. 이로써 GDH와 CDH는 서로 다른 것이며 사이클로헥사놀의 산화는 비특이적인 GDH에 의한 것이 아님을 확인하였다. LB 배지에서 A. calcoaceticus C10을 4시간 배양 후 사이클로헥사놀을 첨가할 경우 배양 24시간에 LB 배지에서보다 약 8배의 CDH 활성을 나타내었으며 생육도는 약 2배의 증가현상을 나타내었다. CDH는 사이클로헥사놀, 사이클로헥사논 cyclohexan-1,2-diol 및 cyclohexene oxide에 의해 유도되었으나 ${\varepsilon}-caprolactone$과 adipate에 의해서는 유도되지 않았다.