Isolation of Conditional Lethal Temperature-sensitive Mutants of Bacillus sphaericus

Bacillus sphaericus의 치사감온성 돌연변이체의 분리

Bacillus sphaericus was mutagenized with UV light irradiation and dimethyl sulfate. Thirty-five conditional lethal temperature-sensitive(ts) mutants were isolated at the nonpermissive temperature of $42^{\circ}C$ and classified into three groups by their growth characteristics on the nutrient broth, peptone glucose yeast extract agar and mineral salts agar. First was the lethal ts group, 24 mutants, which did not grow at the nonpermissive temperature, the second, 9 mutants, was the less growth is group whose growth was restricted to one-half, and the third, 2 mutants, was the cold lethal ts group whose growth was restricted at the permissive temperature($25^{\circ}C$and $30^{\circ}C$)

Bacillus sphaericss 1593균주를 ultra violet light (366nm, 253.7nm)와 dimethyl sulfate으로 처리하여 다수의 감온성 돌연변이체를 분리하여 이중 25균주를 선택하였고 24개의 감온성 돌연변이체는 $42^{\circ}C$의 제한온도에서 전혀 성장을 하지 않았으며, 9개의 감온성 돌연변이체는 제한온도 $42^{\circ}C$에서 허용온도의 성장과 비교하여 1/2정도의 감소를 보였다. 기타 2개의 감온성 돌연변이체는 저온 민감성인 감온성 돌연변이체로서 허용온도($30^{\circ}C$)에서의 성장이 제한온도($42^{\circ}C$) 성장보다 감소를 보였다. 이러한 결과에 따라서 감온성 돌연변이체를 치사군과 비치사군 및 저온민감성 감온성 돌연변이체로 분리할 수 있었다. 또한 치사군의 제한온도에서의 발육은 고체배지 및 액체배지 양쪽에서 성장을 하지 않는 반면 비치사군들의 돌연변이체들은 제한온도 $42^{\circ}C$에서 고체배지 및 액체배지의 성장은 허용온도에서 배양한 결과보다 저조한 성장을 나타내었다. 감온성 돌연변이체들은 $42^{\circ}C$에서 12시간 배양한 후 허용온도인 $30^{\circ}C$ 액체배지로 이식하여 배양한 결과 치사군중 ts-U1112, ts-D1290, ts-D1342, ts-D1504 돌연변이체들은 성장을 계속하지 않았으며, ts-U351, ts-U828, ts-U892, ts-D1350, ts-D1479, ts-D2601과 ts-D2801 돌연변이체들은 성장이 계속됨을 관찰할 수 있었다.