Isolation and Culture of In Vitro Cultured Populus alba×P. grandidentata Protoplasts

Populus alba×P. grandidentata 조직배양(組織培養) 식물체(植物體) 원형질의 분리(分離)와 배양(培養)

  • Received : 1985.10.07
  • Published : 1985.12.30

Abstract

Protoplast-source meterial and enzyme strength had a significant influence on protoplast yield from hybrid poplar, Populus alba ${\times}$ P. grandidentata. The yield of protoplasts from in vitro culture of 1 month-old plantlets was more than that from greenhouse grown 4 month-old stock plant. In vitro cultured plantlets regulary produced more viable protoplasts with E-I enzyme solution (0.5% cellulase and 0.1% macerase) than those with E-II enzyme solution (1.0% cellulase and 0.2% macerase) after overnight incubation. The mean yield of protoplasts from in vitro cultured plantlets was $4{\times}10^6$ with E-I enzyme solution. Cell division was observed in these protoplast cultures after 7-10 days. Protoplast-derived hybrid poplar cells survived over 3 weeks in culture and some continuous cell divisions were evident. Other aspects associated with protoplasts from in vitro cultured plantlet are also discussed.

포플러류(類)의 원형질 분리(分離)와 배양(培養)에 관(關)한 기초(基礎) 연구(硏究)로서, 북미(北美)의 자연잡종(自然雜種) 포플러, P. alba ${\times}$ P. grandidentata 동일(同一) clone의 조직배양(組織培養) 식물체(植物體)와 온실(温室)에서 생육(生育)한 묘목(苗木)을 이용하여 2종류(種類) 효소처리(酵素處理)에 의(依)한 원형질분리량(分離量)과 생장(生長)을 조사(調査)하였다. 조직배양(組織培養) 식물체(植物體)(1개월생(個月生))가 온실(温室)에서 생육(生育)한 묘목(苗木)(4개월생(個月生))에서 보다 많은 양(量)의 원형질을 분리, 생산(生産)하였다. E-I 효소용액(酵素溶液)(0.5% cellulase와 0.1% macerase)이 E-II 효소용액(酵素溶液)(1.0 cellulase와 0.2% macerase)보다 조직배양(組織培養) 식물체(植物體)로부터 원형질을 분리(分離)하는데 보다 더 효과적(效果的)이었으며, 평균(平均) $4{\times}10^6$의 원형질을 분리(分離)할 수 있었다. 이들 분리(分離)된 원형질을 NAA(2.0mg/l)와 BAP(0.5mg/l)가 첨가된 MS 액체배지(培地)에 배양(培養)했을 때 7~10일(日) 후(後)에는 세포분열(細胞分裂)을 관찰할 수 있었으며, 약(約) 3주(週)까지 세포분열(細胞分裂)이 계속되어 6~10개(個)의 세포군(細胞群)을 관찰할 수 있었다.

Keywords