Study on the Purification of 5'-Ribonucleotide

5'-Ribonucleotide의 분리(分離) 정제(精製)에 관(關)한 연구(硏究)

The purification of 5'-riboncleotide using ion exchange resins has been studied and the optimum conditions were determined. The amount used of Amberlite IR120 ion exchange resin in 2nd resin tower could be reduced up to 20% by pretreating the hydrolyzed RNA solution in 1st resin tower. The amount used of regenerant could be also reduced up to 20% by desalting the hydrolyzed RNA solution in the 1st tower, because the desalted solution eluted easily by the water in the 2nd tower. The crystal obtained in this experiment was the mixed-crystals of $5'-IMP.Na_2\;and\;5'-GMP.Na_2$. The crystallization of the complexes formed from $5'-IMP.Na_2\;and\;5'-GMP.Na_2$ gave the best result at pH 7.6. The yield of crystal complexes formed from $5'-IMP.Na_2\;and\;5'-GMP.Na_2$ was obtained higher in high MeOH concentration. However, in higher than 60% MeOH concentration the products was amorphous. The higher content of MeOH for the crystallization of the product gave the smaller value of $5'-IMP.Na_{2}/5'-GMP.Na_2$.

RNA를 효소분해하며 얻은 5'-ribonucleotide를 공업적으로 분리 정제하기 위한 최적(最適) 조건(條件)을 검토한 결과 다음과 같은 결론(結論)을 얻었다. 제 1수지탑에서 미리 전처리를 한 후 제 2수지탑에서 5'-nucleotide를 분획(分劃) 정제함으로써 강산성양이온교환수지 사용량을 줄일 수 있었다. 제 2수지탑은 탈염된 5'-nucleotide를 통액(通液)하고 물로 쉽게 용리(溶離)되기 때문에 재생제(再生劑) 사용량을 줄일 수 있었다. 본 실험에서 얻어 진 결정은 $5'-IMP{\cdot}Na_2$과 $5'-GMP{\cdot}Na_2$의 혼정(混晶)임을 알 수 있었다. $5'-IMP{\cdot}Na_2$과 $5'GMP{\cdot}Na_2$혼정(混晶)을 얻기 위한 정석(晶析) pH는 7.6이 가장 좋았다. $5'-IMP{\cdot}Na_2$와 $5'-GMP{\cdot}Na_2$혼정(混晶)의 수율은 메칠알콜 함량이 높을 수록 좋았으나 60% 이상에서는 무정형(無晶型)을 형성하였다. 정석(晶析) 작업시 메칠알콜 함량이 높아짐에 따라서 결정중의 $5'-IMP{\cdot}Na_{2}/5'-CMP{\cdot}Na_2$의 비율은 적어졌다.