The Effect of Acidic pH on the Spectral Properties of Bacteriorhodopsin

산성 pH가 박테리오로돕신의 분광학적 성질에 미치는 효과

  • Quae Chae (Korea Tobacco Research Institute)
  • 채쾌 (한국연초연구소)
  • Published : 1979.10.30

Abstract

Purple membrane from Halobacterium halobium was incorporated into 7.5% polyacrylamide gels. Absorption and circular dichroic spectra of purple membrane incorporated with gels were obtained at various pH. The spectra of these gels measured at pH 7.0 were essentially identical with those obtained in the aqueous suspension of purple membrane. Acid titration of the gels showed the transition to a form absorbing at 605nm $(bR_{605}^{acid}$) at pH 2.6, and to a second form at 565nm $(bR_{565}^{acid})$ at pH 0.8. Dark-adapted gels showed an isosbestic point for each transition whereas light-adapted gels did not. Visible CD spectra of $bR_{570}^{LA},\;bR_{305}^{acid}\;and\;bR_{565}^{acid}$ all showed the typical bilobed pattern. CD spectra measured at UV wavelength region were also independent of the variation of pH in terms of molar ellipticity and spectral shape. The protonated species $bR_{605}^{acid}$ may be one of the intermediates formed during the normal photochemical cycle of purple membrane. Most probably, the species $bR_{605}^{acid}$ is considered to be $O^{640}$ in the cycle.

Halobacterium halobium으로부터 분리 정제된 퍼플멤브레인을 7.5% 폴리아크릴아미드겔에 혼합시켰다. 이 겔을 사용하여 pH 변화에 따른 흡수 스펙트라와 원편광 이색성스펙트라를 얻었다. pH 7.0에서 보여준 이들 스펙트라의 성질들은 수용액내에 부유하고 있는 퍼플멤브레인으로부터 얻은 것들과 동일하였다. pH 2.7에서는 최대흡광도를 605nm에서 나타내었으며 pH 0.8에서는 565nm에서 보여주었다. 광에 노출되지 않았던 겔의 경우는 광에 노출되었던 겔과는 달리 등흡광점을 보여주었다. pH 2.7과 pH 0.8에서 측정한 원편광 이색성스펙트라는 pH 7.0에서 보여준 bilobed형을 유지하였으며 UV영역에서 분자편광도나 스펙트라의 모양도 pH에 따라 큰 영향을 받지 않았다. pH 2.7에서 생성된 bR605acid 가 퍼플멤브레인의 정상 광화학 순환기 중간 생성물인 $O^{640}$와 유사한 성질을 가진종이 아닐까 추측된다.

Keywords

References

  1. Nature New Biol. v.233 D. Oesteshelt;W. Stoeckenius
  2. Nature v.257 R. Henderson;P. N. T. Unwin
  3. Biochem. Biophys. Res. Commun v.67 M. P. Heyn;P. J. Bauer;N. A. Dencher
  4. Biochem. Biophys. Res. Commun. v.69 B. Becher;T. G. Ebrey
  5. Eur. J. Biochem. v.40 D. Cesterhelt;M. Meentzen;L. Schuhmann
  6. Proc. Nat. Acad. Sci. USA v.71 A. Lewis;J. Spoonhower;R. A. Bogomolni;R. H. Lozier;W. Stocckenius
  7. Biophys. J. v.15 R. H. Lozier;R. A. Bogomolni;W. Stoeckenius
  8. Biochem. Biophys. Acta. v.440 R. H. Lozier;W. Niederberger;R. A. Bogomolni;S. B. Hwang;W. Stoeckenius
  9. Fed. Proc. v.36 R. H. Lozier;W. Niederberger
  10. Eur. J. Biochem. v.37 D. Oesterhelt;B. Hess
  11. Biochem. Biophys. Res. Comm. v.75 M. Yoshida;K. Ohno;Y. Takeuchi;Y. Kahawa
  12. Biophys. J. v.16 B. Becher;J. Y. Cassim
  13. Biophys. J. v.17 A. Lewis;J. P. Spoonhower;M. A. Marcus;A. T. Lemby
  14. Proc. Nat. Acad. Sci USA v.74 J. Terver;A. Campion;M. A. El-Samyed