• 제목, 요약, 키워드: Phenoloxidase

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톱밥배양한 느타리버섯 균사생장시 생산되는 각종 효소변화 (Changes in activities of protease, phenoloxidase and cellulase during mycelium growth of Pleurotus ostreatus in sawdust cultures)

  • 장현유;김광포;차동열
    • 한국균학회지
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    • v.24 no.2
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    • pp.149-154
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    • 1996
  • 느타리버섯 균사를 톱밥에 배양할 때 분비되는 여러 가지 extracellular enzyme중 pretense, phenoloxidase, cellulase가 배양조건을 달리하였을 때 변화양상을 요약하면 먼저 톱밥의 종류에 따라서는 참나무톱밥에 비해 포플라톱밥이 specific activity가 높은 경향이었다. 첨가제 종류에 따라서는 밀기울에 비해 미강이 약간 높았으며 혼합비율이 30, 20, 10%순으로 높았다. 수분함량은 3가지 효소 모두 70%에서, 배지의 PH에 따라서 protease는 pH 4와 9, cellulase는 pH6, phonoloxidase는 pH 5와 7, 배양온도는 3가지 효소 모두 $25^{\circ}C$, 목초액 농도에 따른 pretense와 phonoloxidase는 무처리가 처리보다 총활성이 높았으며, cellulase는 0.5%에서 총활성이 가장 높았다.

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Coprinus congregatus의 빛에 의한 분화와 phenoloxidase의 역할

  • 최형태
    • 미생물과산업
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    • v.14 no.3
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    • pp.12-14
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    • 1988
  • 빛에 의한 생물체의 분화는 작용파장별로 분류 할 때 고등식물에서 흔히 나타나는 붉은 빛에 의한 분화와 곰팡이류에서 볼 수 있는 푸른빛에 의한 것 두 종류가 있다. 곰팡이는 Chlorophyll이나 Phytochrome이 없어 붉은ㅅ개 파장을 흡수하는 phytochrome에 의한 분화는 없으나 푸른색은 곰팡이의 생활사에 중요한 요인이 된다. 예를 들면 Phycomyces와 Trichoderma의 photophorogenesis, Cyathus와 Coprinus의 fruiting body형성, Poycomyces와 Neurospora의 photocarotenogenesis, Phycomyces와 Pilobolus의 phototropism등 곰팡이의 metabolism과 development가 푸른 빛에 의하여 영향을 받는다. 한편 곰팡이의 포자및 포자생성기관은 녹색, 갈색, 흑색 등 phenoloxidase의 산물인 melanin 색소를 가지는 경우가 많으며 그 예로는 Podospora, Schizophyllum, Aspergillus 등과 같이 reproduction 할 때 phenoloxidase가 직접적 혹은 간접적으로 연관되어 있다. 버섯형성균류의 하나인 Coprinus congregatus는 버섯형성과정에서 빛을 필요로 하며 이때 phenoloxidase가 어떠한 역할을 하는지 실험하였다.

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Activated Phenoloxidase Interacts with A Novel Glycine-rich Protein on the Yeast Two-hybrid System

  • Lee, Sun-Woo;Lee, Hyun-Seong;Kim, Eun-Jun;Yoo, Mi-Ae;Lee, Bok-Luel
    • BMB Reports
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    • v.34 no.1
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    • pp.15-20
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    • 2001
  • One of the innate immune reactions in invertebrates is the pro-phenoloxidase (pro-PO) activation system that is involved in the generation of superoxide, melanin synthesis, and the subsequent sequestration of foreign matter entering the hemocoel of the invertebrates. However, the molecular mechanism of this biological reaction is still obscure. To expand our understanding of the biological roles of the pro-PO activation system in invertebrates, we performed a yeast two-hybrid screening by using three regions of pro-PO as bait and a yeast two-hybrid cDNA library from Tenebrio molitor larvae as prey We isolated a novel partial cDNA clone that encodes a glycine-rich protein that interacted with the active phenoloxidase (termed phenoloxidase interacting protein, POIP). POIP consists of two domains: One is an N-terminal unique domain and the other is a C-terminal glycine-rich domain. The C-terminal glycine-rich domain showed sequential homology with those of insect antifungal proteins. Also, the yeast two-hybrid screen in a reverse orientation (using POIP as bait) yielded PO, suggesting that the PO-POIP interaction is specific. By using a 315 bP PCR fragment of the N-terminal unique region of POIP, we cloned the full-length cDNA of POIP from the Tenebruo cDNA library constructed by using E. coli injected larvae. The interaction analysis between PO, and a truncated fragment lacking the N-terminal unique region of POIP, indicated that the N-terminal unique region is necessary for interaction between PO and POIP. The expression level of the POIP mRNA is increased by bacterial injection into T. molitor larvae. This suggests that POIP might be engaged in the humoral defense reaction.

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저온 액화성 응고제를 사용한 고체배지에서 자란 coprinus congregatus의 phenoloxidase들의 localization (Localization of phenoloxidases in coprinus congregatus grown on a low-temperature-liquifying medium)

  • 최형태
    • 한국미생물학회지
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    • v.28 no.3
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    • pp.274-277
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    • 1990
  • 새로운 고체배지 응고제인 Pluronic Polyol F127을 한천대신 사용하여 C. congregatus를 배양하였고 균사 끝(hyphaltip)에 있는 phenoloxidase들의 세포내에서의 존재위치를 확인하였다. 고체배지의 균사에서 원형질체를 얻었고 concanavalin A를 처리하여 세포막을 분리하였다. 세포막 분획에 phenoloxidase들이 존재하였고 이는 이 효소가 light receptor complex의 한 부분임을 시사한다.

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화랑곡나방(Plodia interpunctella)의 페놀옥시데이즈 활성화에 대한 이산화염소의 억제 효과 (Inhibitory Effect of Chlorine Dioxide on Phenoloxidase Activation of the Indianmeal Moth, Plodia interpunctella)

  • 김민현;권혁;김욱;김용균
    • 농약과학회지
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    • v.20 no.2
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    • pp.138-144
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    • 2016
  • 페놀옥시데이즈(phenoloxidase: PO)는 산화효소로서 곤충의 면역 및 표피층 경화 반응에 중요한 생리적 기능을 담당한다. 이산화염소는 높은 산화력을 바탕으로 미생물 및 곤충에 이르기까지 다양한 살균 및 살충효과를 갖고 있다. 본 연구는 곤충의 면역계에 중요한 역할을 수행하는 PO를 대상으로 이산화염소의 억제작용을 분석하였다. 화랑곡나방의 PO 활성은 혈구 및 혈장 모두에서 검출되었다. 이 PO 활성은 세균 침입에 따라 특히 혈장에서 뚜렷한 증가를 나타냈다. 그러나 세균 처리와 함께 이산화염소가 동시에 처리되면 이러한 PO 활성 증가는 나타나지 않았다. 반면에 면역 처리로 활성화된 PO에 대해서 대해서는 억제효과를 주지 못했다. 본 연구는 이산화염소가 PO의 활성을 억제하며, 이러한 억제는 PO의 활성화 단계에서 일어나는 것으로 나타내고 있다.

Coprinus congregatus의 분화와 Phenoloxidase와의 관계 (Phenoloxidases and Photomorphogenesis in Coprinus congregatus)

  • 최형태
    • 한국식물학회:학술대회논문집
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    • pp.157-167
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    • 1987
  • The have been many reports that phenoloxidase are correlated with development in many fungi. C. congregatus, one of nushroom-forming basidiomycetes, which requires light for its development also has phenoloxidases. In C. congragatus, there are two sets of membrane-associated phenoloxidase (PHO I and PHO II) which are differentiated by their isozyme patterns, and each enzyme set consists of two different subtrate specific enzyme protein; o-tolidine reacting enzyme, and DOPA reacting enzyme. PHO I which is localized by a protoplast-concanavalin A technique by using a new solidifying agent, Pluronic Polyol F 127, instead of agar appears in the vegetative hyphae, and PHO II appears at the early primordial stage on agar and at the sclerotial stage of liquid shake cultures. Inhibition of PHO I with the enzyme inhibitors inhibits mushroom formation as well as melanization of the vegetative hyphae at concentrations which do not inhibit the vegetative growth. PHO I deficient mutants do not form mushrooms or melanins, and the mutants show abnormal nuclear migration patterns. PHO II has roles; possibly cementing the adjacent hyphae during the actual three dimensonal structure formation, and melanizing mushrooms and sclerotia. The possible roles of PHO I in the light reception complex and in melanin formation, the function of malanin, and possible roles of postulated post translational modifying enzymes which regulate the phenoloxidases, nuclear migration pattern, and self-nonself recognition mechanism are discussed.

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붉은 지렁이(Lumbricus rubellus) 체내로부터 정제한 Phenoloxidase (Endogenous Phenoloxidase Purified from an Earthworm, Lumbricus rubellus)

  • 백승렬;조은정;유경희;김유삼;서정진;장정순
    • 한국동물학회지
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    • v.39 no.1
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    • pp.36-46
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    • 1996
  • 붉은 지렁이(Lumbricus rubellus)로부터 체내에 존재하는 phenoloxidase (EPO)를 ammonium sulfate. Blue-2, Phenyl-, Q-sepharose chromatography등을 이용하여 정제하였다. 이 효소는 SDS-PAGE상에서 59 kDa의 분자량을 갖는 단일 단백질로 나타났으며 nondenatudng-PAGE를 이용하여 DL-dopa를 기질로 in situ 염색 결과, 210 kDa 보다 다소 큰 단일 band가 dopachrome 침착에 의해 형성되었다. 이는 곧 이 효소가 자연상태에서 복합체의 형태로 존재하고 있음을 의미한다. 또한 이 효소는 monophenolase 활성도, 즉 tyrosine을 dopa로 전환시키는 활성도도 갖고 있음을 470nm에서 dopachrome축적을 관찰함으로써 확인할 수 있었다. Phenyithiourea(PUT), 1, 10-phenanthroline, EDTA, EGTA등을 사용한 효소억제 실험 결과, PTU만이 65 $\mu$M의 IC 0.5로 효소 활성도를 효과적으로 억제시켰다. 이는 EPO의 촉매기작에서 구리가 매우 중요한 역할을 하고 있음을 의미한다. 이 효소는 L-dopa를 기질로 사용하였을 때 35$^{\circ}C$와 pH8.0에서 최적의 활성도를 나타내었다. EPO의 L-dopa에 대한 Km은 pH6.5와 8.0에서 각각 1.86 mM과 13.8 mM로 나타났다. 또한, pH 8.0에서 Vmax는 pH 6.5에서 보다 약 6.6배 높은 반면, 각 조건에서 촉매 효율성은 거의 차이가 없음 [(kat/Km)pH8.0/(kcat/Km)pH6.5 = O.92]을 알 수 있었다. 따라서, 이 사실은 EPO 촉매기작에 미치는 pH의 효과가 효소 자체에보다는 기질 또는 효소-기질 복합체 형성과정에 영향을 줌을 의미한다. 이와 같은 사실을 종합해 보면, L. rubellus에 존재하는 phenoloxidase는 oligomeric form을 가지며 활성화 되기 위한 제한적 단백질 가수분해를 필요로 하지 않는다. 따라서, prophenoloxidase activating system의 존재 가능성을 완전히 배재할 수는 없으나 지렁이 체내의 PO는 최소한 부분적으로나마 latent from으로 존재함을 확인할 수 있었다. 이는 외부 침입시 host를 보호하기 위한 방법으로 EPO를 latent from으로 유지 시킬 수 있는 또는 활성화 시킬 수 있는 조절기작의 존재를 예측하게 한다.

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