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Pharmaco-medical Application of Antimicrobial Peptides Derived from Insect

곤충유래 항균 펩티드의 의약학적 적용

  • Lee, Joon Ha (Department of Agricultural Biology, National Institute of Agricultural Sciences, Rural Development Administration) ;
  • Kim, In-Woo (Department of Agricultural Biology, National Institute of Agricultural Sciences, Rural Development Administration) ;
  • Kim, Mi-Ae (Department of Agricultural Biology, National Institute of Agricultural Sciences, Rural Development Administration) ;
  • Yun, Eun Young (Department of Agricultural Biology, National Institute of Agricultural Sciences, Rural Development Administration) ;
  • Hwang, Jae Sam (Department of Agricultural Biology, National Institute of Agricultural Sciences, Rural Development Administration)
  • 이준하 (국립농업과학원 농업생물부 곤충산업과 신소재개발연구실) ;
  • 김인우 (국립농업과학원 농업생물부 곤충산업과 신소재개발연구실) ;
  • 김미애 (국립농업과학원 농업생물부 곤충산업과 신소재개발연구실) ;
  • 윤은영 (국립농업과학원 농업생물부 곤충산업과 신소재개발연구실) ;
  • 황재삼 (국립농업과학원 농업생물부 곤충산업과 신소재개발연구실)
  • Received : 2016.05.25
  • Accepted : 2016.06.27
  • Published : 2016.06.30

Abstract

By this time, insect antimicrobial peptides (AMPs) have been characterized more than 150 peptides since purification of cecropin in the hemolymph of pupae from Hyalophora cecropia in 1980. Therefore, it is considered that insects are good sources of AMP selection. Insect AMPs are small (low molecular weight) and cationic, and amphipathic with variable length, sequence, and structure. They perform a pivotal role on humoral immunity in the insect innate immune system against invading pathogens such as bacteria, fungi, parasites, and viruses. Most of the insect AMPs are induced rapidly in the fat bodies and other specific tissues of insects after septic injury or immune challenge. Then the AMPs subsequently released into the hemolymph to act against microorganisms. These peptides have a broad antimicrobial spectrum against various microbes including anticancer activities. Insect AMPs could be divided into four families based on their structures and sequences. That is the α-helical peptides, cysteine-rich peptides, proline-rich peptides, and glycine-rich peptides/proteins. For instance, cecropins, insect defensins, proline-rich peptides, and attacins are common insect AMPs, but gloverins and moricins have been identified only in lepidopteran species. This review focuses on AMPs from insects and discusses current knowledge and recent progress with potential applications of insect AMPs.

Keywords

Antimicrobial activity;antimicrobial peptides;innate immunity;insect;pathogen

서 론

곤충은 지구상에서 가장 번성한 동물군 중에 하나이며 평균 550만 종으로 종의 범위는 260-780만 종이 존재할 것으로 예상된다[99]. 이렇듯 많은 종의 다양성을 갖는 곤충은 생태학적으로 바다를 제외하고 다양한 환경에 노출되어 적응하며 개체수를 유지하여왔다. 그러므로 곤충은 매우 효율적인 생체방어체제를 가지고 있을 것으로 예상되었고 연구를 통해 체액성면역과 세포성면역으로 구성된 선천성 면역체계를 가지고 있음이 밝혀졌다. 그 중 체액성면역에서 중요한 역할을 하는 항균 펩티드가 존재함이 실험을 통해 알려졌다. 곤충은 침입하는 미생물들에 대항하여 리소자임(lysozyme)과 같은 다양한 종류의 항균 단백질과 항균 펩티드를 만들어 낼 수 있다. 곤충에서 이러한 물질들의 항균 활성은 박테리아로 면역화 시킨 거인누에나방(가중나무고치나방과 세크로피아누에나방)의 번데기에서 처음으로 확인[9, 36]되었으며 나중에는 박테리아로 면역화 시킨 초파리(Drosophila melanogaster)에서도 확인되었다[92]. 곤충의 항균 펩티드인 세크로핀(cecropin)이 1980년에 세크로피아누에나방의 번데기로부터 최초로 정제[49, 98]된 이래로 150개가 넘는 곤충 항균 펩티드들이 확인되어 왔다. 대부분의 곤충 항균 펩티드들은 크기가 작으며 양전하를 띠고 염기성인데 박테리아나 진균류를 포함하여 기생충(parasite)과 바이러스에도 활성을 나타내는 것으로 알려져 있다. 이들 곤충 항균 펩티드들은 구조와 아미노산 서열상의 특징에 따라 크게 4개의 그룹으로 나눌 수가 있는데 세크로핀과 모리신(moricin) 같은 α-나선형 펩티드, 곤충 디펜신(defensin)과 드로소마이신(drosomycin)과 같은 시스테인(cysteine)-풍부 펩티드, 아피데신(apidaesin)과 드로소신(drosocin), 그리고 레보신(lebocin) 같은 프롤린(proline)-풍부 펩티드, 그리고 아타신(attacin)과 글로베린(gloverin) 같은 글리신(glycine)-풍부 단백질로 구분된다[16, 86]. 주요한 곤충 항균 펩티드로는 곤충 디펜신, 세크로핀, 프롤린-풍부 펩티드, 그리고 아타신이 확인되어 왔는데 모리신과 글로베린의 경우는 나비목곤충에서만 확인되었다. 초파리의 경우는 앞서 언급한 4개의 그룹 이외에 3개의 그룹이 추가적으로 확인되어 7개의 그룹이 확인되었으며, 초파리의 항균 펩티드 유전자들이 톨(Toll)과 immune deficiency(IMD) 경로(pathway)에 의해서 조절된다는 것이 깊이 있게 연구되어 오고 있다. 이러한 곤충의 다양한 항균 펩티드들은 새로운 소재로서 자원의 보고로 이들 물질을 활용하여 의약학적으로 적용하려는 연구들이 진행되고 있다. 본 총설에서는 곤충 항균 펩티드에 관한 현재까지의 연구와 최근에 진전된 사항들을 포함하여 곤충 항균 펩티드의 의약학적 적용 가능성에 대하여 고찰해보고자 한다.

 

본 론

곤충 디펜신

디펜신은 약 4 kDa의 분자량을 가지며 6개의 보존된 시스테인 잔기가 세 개의 이황화 결합(disulfide bond)을 이루고 있는 양전하의 염기성 항균 펩티드이다. 디펜신은 구조적 특징들에 근거하여 3개의 패밀리(family)로 나뉠 수 있는데 “classical” 디펜신, 베타-디펜신, 그리고 곤충 디펜신으로 구분된다[38]. 곤충 디펜신은 분자량이 작은 양전하의 펩티드로 34-51개의 아미노산 잔기들로 구성되어 있으며 6개의 시스테인 잔기를 갖는 시스테인-풍부 펩티드이다. 사페신(sapecin)으로 명명한 곤충 디펜신이 쉬파리(Sacophaga peregrina) [76, 77]에서 처음으로 보고되었으며, 검정금파리(Phormia terranovae) 디펜신이 박테리아로 면역화 시킨 유충의 혈림프(hemolymph)에서 정제되었다[61]. 이들 디펜신은 전구체의 형태로 합성되며 부분적인 단백질가수분해효소의 절단에 의해 활성화되는 형태로 40개의 아미노산 잔기들로 구성되어있다[32, 76]. 이러한 전구체의 형태는 모기[26], 흡혈파리[68], 그리고 나방류에서[54, 97, 107] 확인되어 왔다. 곤충 디펜신은 주로 그람양성균에 활성을 나타내는데 몇몇 곤충 디펜신은 그람음성균과 진균에도 활성을 갖는 것으로 알려져 있다[67, 72, 91, 97, 104, 106, 112]. 이러한 항균활성은 곤충 디펜신이 미생물들의 세포막과 세포막 구성 성분들과 상호작용하여 결합하고 채널을 형성하여 미생물들을 죽이는 것으로 알려져 있다[28].

Table 1.Gram+: Gram-positive bacteria, Gram−: Gram-negative bacteria, N/A: not available

세크로핀

세크로핀은 31-39개의 아미노산 잔기로 이루어진 양전하의 항균 펩티드 패밀리로 세크로피아누에나방 번데기의 면역화시킨 혈림프로부터 처음 분리되었으며[48, 98], 나비목, 파리목, 그리고 딱정벌레목 곤충들에서 확인되어왔다(Table 2). 세크로핀의 경우도 전구체의 형태로 합성이 되고 시그날 배열(signal sequence)에 의해 분비가 되며 펩티다아제(peptidase)에 의해 신호펩티드(signal peptide)가 제거된 후에 전구체 부분(pre-pro region)이 절단됨에 따라 활성화 형태로 바뀌게 된다. 세크로핀은 그람음성균과 그람양성균뿐만 아니라 진균류에 까지 광범위한 항균활성을 나타낸다[21, 31, 34, 48, 79, 94, 105]. 대부분의 세크로핀들은 C-말단에 아미드화(amidation)가 되어있으며, 이 아미드화된 형태가 리포좀(liposome)과 세크로핀의 상호작용에 중요한 역할을 하며[82] 광범위한 항균활성에 기여하는 것으로 사료된다[70]. 세크로핀은 항균활성 이외에도 말라리아열원충속(Plasmodium)과 파동편모충(Trypanosome)과 같은 기생충들에도 활성을 나타내는 것으로 알려져 있으며[2, 7, 8, 10, 40, 53, 93], HIV-1 바이러스의 복제와 암세포의 증식을 억제할 수 있다는 연구[24, 102, 108]가 보고되어 다양한 활성을 가지고 있음을 알 수 있다. 또한 세크로핀은 수용액상에서는 불규칙코일(random coil)의 구조를 취하지만 세포막과 같은 소수성의 환경에서는 α-나선형 구조로 전환되어 세포막성분들과 상호작용하는 것으로 알려져 있다. 세크로핀의 구조는 N-말단과 C-말단에 두 개의 나선형 부위를 가지며 중앙에 각각의 나선 구조를 연결해 주는 경첩부위(hinge region)가 존재하는 것으로 알려져 있다. 이 경첩부위에는 글리신과 프롤린 잔기들이 존재하며 이들 아미노산이 경첩부위의 유연성에 중요한 역할을 한다[83].

Table 2.Gram+: Gram-positive bacteria, Gram−: Gram-negative bacteria, N/A: not available

아타신

아타신은 박테리아로 면역화 시킨 세크로피아누에나방 번데기의 혈림프로부터 정제되었으며 분자량은 20-23 kDa이고 등전점은 5.7-8.3으로 염기성 아타신(A-D)과 산성 아타신(E와 F)의 두 그룹으로 아이소폼(isoform)이 나뉠 수 있다[46]. 염기성 아타신과 산성 아타신은 아미노산 서열상으로 매우 유사하지만 산성 아타신에서 아스파르트산(Asp) 잔기의 구성이 조금 더 많은 특징이 있으며, 이들 아타신은 두 개의 독립된 유전자에 의해 암호화 된다[59, 101]. 아타신은 신호펩티드, 프로(pro)-펩티드(P 도메인), 그리고 N-말단의 아타신 도메인과 그 뒤를 이어 글리신-풍부 도메인(G1과 G2 도메인)을 함유하고 있는 전구체의 형태로 합성된다[43, 100]. 아타신은 많은 나비목 종들에서[5, 46, 55, 58, 60, 87, 89, 100, 103, 110] 확인되었으며 몇몇은 파리목 종들에서 확인된 바 있다[3, 33, 41, 109]. 대부분의 아타신은 대장균과 몇몇 그람음성 박테리아에 선별적으로 활성을 나타낸다[46]. 예를 들면 체체파리(Glossina morsitans) 아타신-A1은 대장균과 기생충인 감비아파동편모충(Trypanosoma brucei)에 생체외(in vitro) 상에서 활성을 나타내며[47], 흰불나방(Hyphantria cunea) 아타신-B는 대장균과 시트로박터 푸룬디 (Citrobacter freundii) 뿐만 아니라 진균인 칸디다(Candida albicans)에도 활성을 나타낸다[60]. 파밤나방(Spodoptera exigua) 아타신은 그람음성균인 대장균과 슈도모나스 치코리이(Pseudomonas cichorii) 그리고 그람양성균인 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)와 리스테리아 모노사이토제니스(Listeria monocytogenes)에 대항하여 활성을 갖는 것으로 알려져 있다[5]. 그러나 몇몇의 아타신은 류신(leucine)-풍부 영역을 갖는데 이들 아타신은 항균활성을 나타내지 않는다. 그 예로 흰불나방 아타신-A는 류신이 많으며 항균활성을 갖지 않는다[60]. 아타신은 박테리아 외막(outer membrane)에 직접적으로 작용하여 투과성을 높임으로써 대장균의 성장을 저해할 수 있으며[35], 이들 아타신은 지질다당체(LPS)에 결합 만으로도 여러 박테리아의 외막 단백질들의 합성을 저해할 수 있다[17, 18]. 원이색성(CD) 스펙트럼을 통해 세크로피아누에나방 아타신-F의 구조를 분석한 결과 수용액 상에서는 주로 불규칙코일 구조를 취하지만 소수성 유기용매인 헥사플루오로 이소프로판올(HFIP)의 존재 하에서는 훨씬 더 나선형 구조로 전환됨이 관찰되었다[39]. 소수성의 환경에서 나선형 구조로 전환되는 아타신의 이러한 변화는 세크로핀과 글리신-풍부 항균 펩티드인 글로베린과 매우 유사하다. 그러므로 아타신의 나선형 구조가 항균활성을 나타내는데 주요할 것으로 예상된다.

프롤린-풍부 펩티드

레보신은 대장균으로 면역화 시킨 누에의 혈림프로부터 최초로 분리되었으며 프롤린-풍부 펩티드로 O-글라이코실화(glycosylation)된 32개의 아미노산 잔기로 구성되어 있다[43]. 누에의 레보신은 꿀벌의 프롤린-풍부 펩티드인 아베신(abaecin)과 서열상 41%의 상동성을 갖지만 꿀벌의 아베신은 O-글라이코실화 되어있지 않다. 누에 레보신의 cDNA 클론으로부터 레보신이 179 잔기의 전구체 단백질로서 합성되어짐을 알 수 있었고, 활성을 나타내는 32잔기의 펩티드는 전구체의 C-말단에 가깝게 위치하고 있다[25]. 레보신 전구체를 암호화하는 cDNA들은 다른 나비목 종들에서 또한 확인되어 왔다. 레보신을 포함한 프롤린-풍부 펩티드들은 4개에서 6개의 프롤린을 가지며 22-28 잔기들 사이의 범위 안에 있고 성숙한 전구체 단백질의 N-말단에 위치하지만, 누에의 레보신 전구체만이 7개의 프롤린을 가지며 추가적인 32잔기의 펩티드를 C-말단에 근접하여 위치하고 있다[88]. 이들 결과는 활성을 나타내는 레보신은 전구체 단백질이 단백질가수분해효소의 절단에 의해 생성되어짐을 나타낸다. 레보신은 그람음성 및 그람양성 박테리아와 몇몇 진균류에 대항하여 활성을 갖는다(Table 3). 누에의 레보신은 대장균과 그람음성 아시네토박터(Acinetobacter) 종들에 대항하여 활성을 나타내며, O-글라이코실화가 최대 활성을 갖기 위해 필요하다[43]. 담배박각시나방(Manduca sexta)의 합성한 N-말단 프롤린-풍부 펩티드 레보신-B (28 잔기) 와 레보신-C (27 잔기) 는 그람음성 세라티아 마르세센스(Serratia marcescens)와 쥐티푸스균(Salmonella typhimurium) 그리고 그람양성 황색포도상구균(Staphylococcus aureus)과 세레우스균(Bacillus cereus) 뿐만 아니라 진균인 크립토코쿠스 네오포르만스(Crytococcus neoformans)에도 활성을 나타낸다[88]. 이들 결과는 누에를 포함한 다른 나비목 종들로부터의 N-말단 프롤린-풍부 펩티드들 또한 활성을 나타낼 것임을 제시한다. 여러 다른 곤충들에서 프롤린-풍부 항균 펩티드들이 다양한 이름으로 확인되어 왔다(Table 3). 이 작은 프롤린-풍부 펩티드들은 여러 곤충목(order)에서 확인되었는데 이들 펩티드들은 아미노산 서열상에서 높은 유사성을 갖지는 않지만 모두 프롤린을 많이 함유하고 있으므로 프롤린-풍부 항균 펩티드의 같은 패밀리로 속하여야 한다. 또한 몇몇 곤충의 프롤린-풍부 펩티드는 O-글라이코실화 되어 있지만 반면 몇몇 다른 곤충들에서는 O-글라이코실화가 되어있지 않은데, O-글라이코실화가 분명하게 항균활성을 향상시킨다.

Table 3.Gram+: Gram-positive bacteria, Gram−: Gram-negative bacteria, N/A: not available

모리신

모리신은 대장균으로 면역화 시킨 누에 유충의 혈림프로부터 처음으로 분리된 매우 염기성인 42잔기의 펩티드이다[42]. 모리신은 지금까지 나비목 곤충들에서만 발견되었는데 모리신을 암호화하는 cDNA가 담배박각시나방[114], 담배거세미나방(Spodoptera litura) [84], 꿀벌부채명나방(Galleria mellonella) [12], 왕담배나방(Helicoverpa armigera) [110], 파밤나방, 회색담배나방(Heliothis virescens), 그리고 팔랑나비붙이(Hyblaea puera)에서 확인되었다. 앞서 언급한 바와 같이 레보신은 단백질가수분해에 의해 큰 전구체 단백질로부터 형성되지만, 모리신은 신호펩티드의 절단 후에 분비형태의 단백질로 합성된다. 모리신은 그람음성과 그람양성 박테리아에 활성을 나타내는데 꿀벌부채명나방 모리신은 또한 진균류에 대항하여 높은 활성을 나타낸다[12, 29, 42]. 모리신의 3차구조는 N-말단과 C-말단 부위의 일부 잔기들을 제외하고 거의 전체길이의 펩티드가 여덟 번의 턴(turn)을 하는 하나의 긴 α-나선 구조를 나타낸다[29, 45, 84]. N-말단의 α-나선(5-22번 잔기) 부위는 양친매성(amphipathic)이며 이는 박테리아를 죽이기 위한 막투과성을 높이는데 중요한 역할을 하며, C-말단의 α-나선(23-35번 잔기) 부위는 소수성으로 모리신의 항균활성을 위해 결정적 역할을 한다[45]. 모리신의 이러한 구조는 경첩부위가 없는 것을 제외하고는 세크로핀과 매우 유사하다.

글로베린

글로베린은 염기성의 글리신-풍부 단백질로 열에 안정하고 약 14 kDa의 분자량을 가지며, 산누에나방(Hyalophora gloveri) 번데기의 혈림프로부터 처음으로 정제되었다[4]. 글로베린은 모리신과 마찬가지로 현재까지 나비목곤충들에서만 확인되었다. 글로베린은 전구체단백질로서 합성되며 프로-글로베린의 N-말단 부위에 보존된 RXXR 모티프(motif)가 함유되어있다[111]. 글로베린은 주로 대장균에 활성을 나타내는데 대장균 변종(D21f2, D21, D22)에 더 강한 활성을 갖는다[4, 56, 73, 75, 80, 81]. 그러나 양배추은무늬밤나방(Trichoplusia ni) 글로베린은 또한 바이러스에 활성을 나타내며[80], 파밤나방 글로베린은 그람양성 박테리아(플라보박테륨 속)에 활성을 갖지만 smooth 지질다당체를 가지고 있는 대장균종에 대해서는 활성을 나타내지 않는다[50]. 또한 담배박각시나방 글로베린은 그람양성인 바실러스 세레우스(Bacillus cereus)와 두 종의 진균인 맥주효모균(Saccharomyces cerevisiae)과 크립토코커스 네오포르만스(Cryptococcus neoformans)에 대항하여 활성을 갖지만 smooth 지질다당체를 가지고 있는 대장균종에 대해서는 활성을 나타내지 않는다[111]. 다른 나비목 곤충들로부터의 글로베린이 어떻게 각기 다른 활성을 나타내는지 분명하진 않지만 염기성의 글로베린이 정전기적 인력을 통해 지질다당체와 상호작용 하는 것으로 제시된다[4]. 재조합된 담배박각시나방 글로베린의 경우 지질다당체의 O항원(O-antigen)과 outer core carbohydrate moieties, 그람양성 박테리아의 리포테이코산(lipoteichoic acid)과 펩티도글리칸(peptidoglycan), 그리고 라미나린(laminarin: 베타-1,3-글루칸)에 결합할 수 있음을 보여주었다[111]. 따라서 글로베린은 지질다당체, 리포테이코산, 펩티도글리칸, 또는 라미나린과 상호작용을 통해 박테리아 또는 진균의 표면에 결합을 함으로써 항균활성을 나타낼 것으로 예상된다. 대부분의 글로베린은 염기성이거나 매우 염기성이며 높은 함유량의 글리신 잔기를 갖는다[111]. 글로베린은 수용액상에서는 불규칙코일 구조를 취하지만 소수성의 환경에서는 α-나선형 구조로 입체구조의 전이가 일어난다[4]. 미생물의 표면에 결합함에 따라 불규칙코일 구조에서 α-나선형 구조로 글로베린의 입체구조 전환이 미생물들에 대항하여 항균활성을 갖게 되는 핵심일 것으로 사료된다.

곤충 항균 펩티드의 적용 및 응용

펩티드는 아미노산이 ‘펩티드 결합(peptide bond)’으로 연결된 물질을 말하며, 일반적으로 분자량이 작은 단백질이나 아미노산의 수가 50개 이하인 경우를 펩티드로 정의하고 있다. 이들 펩티드는 생물 의약 및 화학 분야에서 치료제 또는 기능성 물질로 사용되는 주요한 소재이다. 최초의 펩티드는 약 100년 전 에밀 피셔(Emil Fischer)에 의해 합성되었다고 알려져 있지만, 의약품으로 사용되는 시점은 제2차 세계대전 이후이며, 미국의 빈센트 뒤 비뇨(Vincent Du Vigneaud), 스위스의 Ciba Specialty Chemicals, 오스트리아의 Sandoz 그룹만이 순수한 펩티드를 생산할 수 있었다. 이때가 옥시토신(oxytocin), 바소프레신(vasopressin) 등의 이황화 결합을 지닌 9개 아미노산으로 이루어진 펩티드가 개발된 시기이다. 1970년대에 들어와 미국의 화학자 메리필드(Merrifield)에 의해 본격적인 펩티드 합성이 이루어졌으며, 이를 기점으로 미국의 제약회사들이 대거 펩티드 연구에 착수하게 되었지만 실제 임상을 진행해보니 독성은 없었지만 약효 역시 나타나지 않아 연구 개발에 어려움을 직면하게 되었다. 이러한 연구가 새로운 전기를 맞게 된 것은 1980년대 후반이다. 안정화 기술이 개발되어 의약품을 만들 수 있게 됨에 따라 제약사들에 의해 대거 의약품이 만들어졌으며 이를 계기로 90년대에 들어 형질 전환생장인자(TGF) 성분이 개발돼 큰 화제를 불러 모으기도 했다. 많은 바이오 회사에서 흥미 있는 약리적 특성을 지닌 새로운 펩티드 발견과 생체이용률이 높은 펩티드에 대한 고상합성법 최적화, 새로운 약물전달기술 등의 개발로 펩티드 치료제 분야가 부활되었다.

의약품으로의 적용은 단일클론 항체 시장에 진출된 품목은 20종 이상이며, 등록 전 또는 임상 3상단계인 것이 20종 이상이고, 임상 2상단계인 품목 수는 45종 이상이다. 새로운 인간화 단일클론항체가 치료용으로 검증되기 때문에 펩티드 및 단백질 시장에서 가장 빠르게 성장하는 분야이다. 이 분야 최고의 상품은 GP IIb/IIIa 억제제인 리오프로(ReoPro)이고(Eli Lilly), 비록 상품화된 숫자는 적지만, 100종 이상의 후보물질이 임상 실험에 들어간 상태이다. 합성 펩티드의 시장진출은 40종 이상이며, 등록 전 또는 임상 3상은 20종 이상이고, 임상 2상은 60종 이상이다. 이는 펩티드 및 펩티드 모방물질을 포함한 수치이다. 생식선 작용제로서 펩티드는 전립선암, 유방암 등의 내분비관련 종양치료에 사용되고 있으며, 주요제품은 루프로라이드(leuprolide, Abbott Laboratories), 부세렐린(buserelin, Sanofi-Aventis), 졸라덱스(zoladex, AstraZeneca), 트립토레린(triptorelin, Beaufour Ipsen), 나파렐린(nafarelin, Roche) 등이 있다. 상기 의약품의 총 시장규모는 30억 미국달러를 상회하며, 원료의약품으로 약 200 kg 이상이 생성되어 사용되고 있다. 이들 대부분은 합성 펩티드로 특허 만료 의약품이며, 이 분야의 시장은 서방성 제형 기술이 도입된 의약품이며, 향후 몇 년간 지속적으로 시장이 확대될 것으로 보인다. 소마토스타틴(somatostatin) 유사체 분야의 매출규모는 약 9억 미국달러이며, 원료 의약품은 100 kg 미만이고, 치료 적응 증세는 암 성장 억제 효과이며, 2종의 주요 약품 옥트레오타이드(octreotide, Novartis), 소마툴린(somatuline, Ipsen)이 시장에 출시되어 판매되고 있다. 앤지오텐신전환효소 억제제(ACE inhibitor)는 전통적인 유기합성법에 의해 만들어진 변형된 2개의 아미노산으로 구성된 펩티드이나, 대체로 합성 의약품으로 분류하고 있으며, 대표적인 제품으로는 머크(Merck)에서 생산된 상품인 에날나프릴(enalapril)과 리시노프릴(lysinopril)이 있다. 현재는 변형된 펩티드 계열로 만들어진 치료제(앤지오텐신 II 수용체 길항제)의 출현으로 매출 규모가 감소하였으나 현재까지 범용되는 의약품이다. 펩티드 계열이 아닌 라미프릴(ramipril), 트란돌라프릴(trandolapril), 페린도프릴(perindopril)과 같은 앤지오텐신전환효소 억제제도 존재하며, 현재 15종의 의약품이 출시되어 약 40억 달러의 매출규모 및 원료의약품으로 100 톤(ton) 이상이 거래되고 있다. 에이즈 치료제로서 HIV 단백질분해효소 억제제 개발은 스티브 켄트(Steve Kent)와 댄 베베르(Dan Veber)에 의해 효소활성과 기질 설계가 가능해졌으며, 재조합단백질, 단백질 구조학 등 기술의 기반으로 결정구조가 밝혀졌으며 이를 근거로 펩티드 억제제 및 모방 펩티드 억제제가 개발되었다. 시장에 최초로 진출한 HIV 단백질분해효소 억제제는 로슈(Roche)의 사퀴나비르(saquinavir)이며 머크의 인디나빌(indinavir)과 애보트(Abbott)의 리토나비어(ritonavir)가 이후에 출시되었으나, 현재 2세대 약품인 파이저(Pfizer)의 넬피나비어(nelfinavir)가 출시된 상황이고, 이들 의약품의 매출은 15억 달러 정도이며, 약 200톤 이상의 원료의약품이 거래되고 있다. 바소프레신(vasopressin) 유사체는 1950년대에 합성된 물질로 천연 바소프레신은 거의 사용되지 않으며, 페링(Ferring)에 의해 유사체가 개발되면서 치료제 개발이 시작되었다. 가장 유명한 유사체는 데스모프레신(desmopressin) 이며 야뇨증 치료에 사용되고 있다. 또한 유사한 의약품으로 텔리프레신(terlipressin), 리프레신(lypressin), 펠리프레신(felypressin) 등이 출시되어 있으며, 약 3억 달러의 시장규모와 원료의약품으로 50 kg 미만이 거래되고 있다. 칼시토닌(calcitonins)는 현재 고령화 서구사회에서 골다공증 치료제로서 널리 사용되고 있으며, 현재 사용되고 있는 주요 제품은 연어, 인간, 장어 칼시토닌 등을 사용하고 있다. 연어와 사람의 칼시토닌 모두 약효에 차이가 없으며, 32개 아미노산으로 구성된 칼시토닌은 화학합성법보다는 재조합 단백질로 생산할 것이라 예측했으나, 인간 인슐린과는 대조적으로 재조합 칼시토닌은 생산되지 않았고, 총 판매액은 5-6억 달러이며, 원료의약품으로 50 kg 정도가 거래되고 있다. 고나도레린(gonadorelin) 길항제(antagonist)는 지난 20년 동안 고나도트로핀 방출호르몬(LH-RH) 계열 생식선 작용물질(agonist)로 전립선암 및 내분비계 암에 성공적으로 사용되었으며, 이들의 주요단점은 주사 후 종양성장을 촉진하는 호르몬 제거 전에 나타나는 황체형성호르몬(LH)와 난포자극호르몬(FSH)의 급격한 증가와 그에 따른 약 일주일간의 테스토스테론(testosterone) 및 에스트로겐(estrogen)의 급격한 증가 현상이 나타나는 것이다. 따라서 동물실험에서 나타난 것처럼 테스토스테론 급증가 현상이 없는 길항제 치료가 작용제 치료를 대체할 것이지만 테스토스테론 방출을 저해할 수 있는 길항제의 투약량 농도가 작용제에 비해 5-10배 높여야하는 단점이 있다. 이러한 고투약농도 때문에 가격 경쟁력 및 3-6개월 서방성 제형 생산에 어려움이 있다. 대부분이 임상시험에서 실패하였으며 현재 2종류의 길항제가 출시되고 있다. 세트로레릭스(cetrorelix)와 가니렐릭스(ganirelix)가 호르몬 의존성 종양에 비해 시장규모가 작은 부인과 질환 및 체외수정에 사용되고 있다.

최근 메리필드의 고상법(solid phase method)에 의한 펩티드 화학 합성기술의 발전, 자동 합성기 보급에 의한 펩티드 합성의 자동화, 보호기 및 탈보호법 개발을 통한 펩티드 합성 수율 향상 등 다양한 펩티드 공학 기술의 발전으로 많은 종류의 새로운 항균 펩티드가 개발되고 있으며, 또한 핵자기공명 분광법(NMR)과 원이색성 스펙트럼을 이용한 항균 펩티드의 구조와 기능에 관한 연구를 바탕으로 천연형 펩티드보다 세포 독성이 낮고 항균활성이 강한 새로운 합성 항균펩티드 개발에 관한 연구가 급격히 진행되고 있다. 그 예로, 미국의 Demegen사에서 항염증제 및 화상 치료제로 개발 중인 D2A21는 세크로핀 계열의 펩티드를 새롭게 합성한 항균 펩티드이며, 동물 임상시험에서 효과가 우수한 것으로 보고되었고[23], 봉독에서 분리된 멜리틴(melittin)의 세포독성을 제거하기 위해 개발된 세크로핀 A-멜리틴 하이브리드 항균 펩티드(CEME) 역시 동물 임상시험에서 그 안정성이 입증되었으며 개의 리슈만편모충증(leishmaniasis) 치료에 대한 효과를 증명하였다[1]. 이 외에도 항균 펩티드를 이용한 피부질환 치료제로 덴마크의 노보짐(Novozyme) 사에서 개발 중인 플렉타신(plectasin), 독일 바이오신(Biosyn)사의 시아노비린(cyanovirin), 벨기에 루벤 카톨릭 대학교의 beta-Alanyl-tyrosine, 미국 제네라 사(Genaera Corporation)의 Locilex, 인트라바이오틱스(IntraBiotics)의 IB-367(lseganan), Helix Biomedix의 HB50, Demegen의 P113L, 조마(Xoma)의 XMP629 등이 연구 개발 중에 있으며 캐나다 미겐닉스(Migenix)사에서 개발한 MBI 594AN의 경우 임상시험이 완료되어 미국 식품의약국(FDA)에 승인을 취득 중에 있다[95]. 이와 같은 펩티드 공학 기술을 이용한 항균 펩티드의 우수한 항균활성을 갖는 변이체 개발은 각종 피부질환 치료용 의약품 개발 및 응용 분야에서 그 가능성이 매우 높아지고 있다.

곤충유래 항균 펩티드 역시 일부 의약품 개발을 위해서 임상시험이 진행 중에 있으며 그 가능성이 매우 클 것으로 여겨진다. 미국의 Entomed SA 사는 최근까지 100여종의 곤충으로부터 175개 이상의 새로운 물질에 대한 연구를 진행하여 의약품 개발의 가능성을 검정하였으며, 특히 나비목 곤충(회색담배나방)에서 분리된 항진균 펩티드의 변이체인 ETD151을 개발하여 피부의 침습성 진균 감염증(invasive fungal infection)에 대한 임상시험을 수행 중에 있다. 국내에서도 배추흰나비, 풍뎅이, 소똥구리, 흰불나방, 흰점박이꽃무지 등 여러 곤충에서 항균 펩티드를 분리하여 분자적 구조 및 특성에 관한 연구를 수행하고 있으며, 유전공학기술을 이용하여 미생물에서 대량생산을 위한 시도를 하고 있지만 이들 항균 펩티드를 이용한 치료제 개발 및 응용에 관한 연구는 극히 미진한 상태이다. 따라서 곤충 항균 펩티드를 이용한 의약품 개발 및 산업적 응용을 위해서 고분해능 핵자기공명분광법을 이용한 펩티드의 3차원 구조 분석, 이를 통해 인체에 무해하며 활성이 우수한 새로운 항균 펩티드 변이체 개발 및 이의 임상시험을 통한 치료제 개발에 관한 연구의 필요성이 절실히 대두되고 있다. 또한 이와 병행하여 생물자원 확보 측면에서 다양한 국내서식 곤충 종으로부터 우수한 항균활성을 가지는 항균 펩티드의 분리 및 개발에 보다 많은 지원이 뒤따라야 할 것으로 여겨진다. 항균 펩티드는 새로운 개념의 차세대 항생제로 부각되고 있으며, 피부질환 치료제, 항암제, 항바이러스제, 농약, 식품첨가제, 방부제 등 다양한 분야에서 개발될 수 있는 가능성을 가지고 있다.

 

결론 및 전망

펩티드는 정확한 생리활성에 기초하여 생명과학 기술에 의해 개발되고 있는 것으로 그 효능이 매우 뛰어나며, 이미 상당수의 펩티드들이 의약품으로 개발되면서 화장품 소재 등으로도 적용되고 있어 효능과 안전성 두 가지 모두 입증되고 있다. 따라서 펩티드 관련 원료의 가격 단가 안정화와 임상을 통한 기능성 원료의 등재 등이 선행된다면 펩티드는 의약품을 위한 신물질 후보로서의 가능성이 가장 높은 물질 중 하나일 것이다.

Acknowledgement

Grant : 농업생물연구

Supported by : 국립농업과학원

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