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Bubble column bioreactor에서 형질전환된 담배세포의 성장양상 및 β-Glucuronidase의 생산

The Growth of Transgenic Tobacco′s Suspension Culture and the Production of β-Glucuronidase in Bubble Column Bioreactor

  • 김석우 (신라대학교 공과대학 생명공학과) ;
  • 이동근 (신라대학교 생명공학연구소) ;
  • 현진원 (제주대학교 의과대학 생화학과) ;
  • 이상현 (신라대학교 공과대학 생명공학과) ;
  • 하종명 (신라대학교 공과대학 생명공학과) ;
  • 하배진 (신라대학교 공과대학 생명공학과) ;
  • 이재화 (신라대학교 공과대학 생명공학과)
  • 발행 : 2002.10.01

초록

$\beta$-glucuronidase 유전자를 형질전환한 담배에서 여러 조직중에서 가장 activity가 높은 줄기에서 현탁세포를 유도하여 생장 및 발현 양상을 조사하였다. Flask culture와 2.5 L bubble column culture시 세포의 성장에는 큰 차이가 없었지만 $\beta$-glucuronidase의 발현은 bubble column culture시 약 2850 U/mg으로 95배 향상되는 결과를 나타내었다. 하지만 두 경우 모두 $\beta$-glucuronidase의 생산량이 증가와 감소를 반복하는 양상을 나타내었다. 이것은 외래 단백질의 생산과 파괴가 반복적으로 일어나는 것으로 추정이 된다. 또한 bubble column culture의 생산성을 향상시키기 위해 중요한 영양분인 sucrose을 30 g/L로 두 번 첨가한 경우, 다른 영양분의 고갈로 인하여 세포의 최종 생산량은 향상되지가 않았고 $\beta$-glucuronidase는 안정적으로 생산되었지만 최종 생산량은 향상되지가 않았다. 하지만 세포의 크기가 감소하여 배양기 운전이 쉬워지는 장점이 있었고 이것은 세포의 고농도 배양을 통한 재조합 단백질 생산성을 향상시키는 유리하게 작용할 것이다.

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